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编号:12802510
抗Ⅳ型胶原荧光抗体的制备及性质研究(1)
http://www.100md.com 2015年1月1日 中国医药科学 2015年第1期
     [摘要] 目的 采用异硫氰酸荧光素标识Ⅳ型胶原单克隆抗体,为直接或间接荧光方法检测人体肝脏或血液中Ⅳ型胶原含量奠定基础。 方法 采用直接透析方法进行荧光素标识,标识后通过Sephadex G25凝胶过滤,除去多余的荧光素和其他杂质,获得标识荧光抗体纯品。经SDS-PAGE和双向免疫扩散凝胶电泳,对标识抗体进行纯度,荧光特性,抗体特异性进行检测鉴定。 结果 经全自动化学发光荧光图像分析仪检测SDS-PAGE电泳结果,激发波490nm,发射波510nm,在150KD处有一条黄绿荧光带,其他处未见条带出现,凝胶图像分析仪检测纯度达96%;免疫琼脂双向扩散电泳结果显示,标识抗体与未标识抗体与抗原之间均有乳白色沉淀线,且沉淀物含量一致,荧光分析仪检测标识抗体与中心孔之间有黄绿色荧光条带。 结论 采用本研究方法制备的荧光抗体具有纯度高、荧光性好、特异性强等特点 ......
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